Se denomina técnica histológica al conjunto de operaciones a que se somete una materia organizada, a fin de que sea posible su estudio por medio del microscopio, posibilitando la observación de estructuras no visibles al ojo humano.
Pasos de la Técnica histológica
-->Obtención del material histológico para estudiar
--> Proceso de fijación
-->Lavados
-->Deshidratación
-->Aclaramiento
-->Infiltración
-->Inclusión
--> Microtomía
-->Tinción
-->Observación (Este último no es considerado como un paso de la técnica histologica por varios autores)
-->Obtención del material histológico
Los tejidos se pueden obtener de diferentes formas:
-->Biopsia
-->Abiopsia
-->Necropsia (llamada vulgarmente autopsia)
-
->Fijación
En este paso el tejido obtenido se coloca en una sustancia fijadora para evitar los cambios post-mortem Unos de los fijadores mas usado es el Formol al 10% (Formaldehido)
Lavados
Se debe lavar el tejido para quitar exeso de fijador
-->Deshidratacion
Suena incoherente que se deba lavar el tejido y despues deshidratarlo, entonces ¿para que lavarlo? El exeso de fijador al momento de la infiltración, incluso en la microtomia, podría afectar los cortes, por eso se debe lavar. La deshidratacion se hace con el uso de alcohol de una menor concentracion a una mayor.
-->Aclaramiento
En este paso el se sustituye el alcohol por un disolvente de parafina lo mas usado es el Xilol (Xileno) ya que como esta deshidratado el xilol entrara hasta la mas profundo del tejido. Tambien el tejido pierde color hasta un tono acaramelado
-->Infiltración
En este paso la muestra se coloca en parafina liquida, cabe mencionar que se debe usar parafina histológica, como se ha dicho en el paso anterior el tejido esta completamente lleno de xilol, ahora debido a osmosis sale el xilol y entra la parafina
-->Inclusión
Aqui se forman bloques de parafina y dentro de estos bloques estan las muestras a estudiar. hay maquinas especializadas para la inclusion en parafina de tejidos Despues que se incluyeron los bloques y por conseunte se dejaron secar, estos se deben poner a enfriar en un congelador para su posterior corte
-->Microtomia
Se realizan cortes muy delgados que van deacuerdo a lo requerido o costumbre del laboratorio donde se realice la técnica, los cortes van desde .5 micras hasta 8 u 10 micras. Los cortes se echan al baño de flotacion y se ´pescan´ con un portaobjetos, se marca con la fecha, el tejido que es y con que tincion se va a procesar.
-->Tinción
Hay muchos tipos de tinciones para diferenciar en los tejidos diferentes estructuras o sustancias
La tincion mas usada o tambien llamada "De Rutina" es la de Hematoxilina y Eosina (HyE) esta usa un colorante llamado Hematoxilina en su composición según Harris que tiñe las sustacias ácidas o que las contengan, como el núcleo que contiene el Ácido Desoxirribonúcleico (ADN) La Eosina Amarillenta tiñe las estructuras básicas como el citoplasma y demas organelos
Otra tinción muy usada es la de papanicolau Usa colorantes como:
-OG6
-EA50
-Hematoxilina de Harris o Básica segun el caso
-Esta tincion es muy usada para teñir excresiones corporales como saliva, orina, etc. (La sangre NO es una excresion)
Como se menciono anterormente hay muchas tinciones Otros ejemplos son:
-Masson
-PASCHIFF
-Perls
-Plata Metenamina
-Warthin-Starry
-Ziehl-Neelsen
-Van Gieson
-Azul Alciano
-Sudan III
-Rojo Congo
Entre muchas otras tinciones...
En este paso despues de teñir se monta, es decir se coloca un cubreobjetos y se ´pega´con resina. Cabe mencionar que alguna gente toma como un paso mas de la Técnica Histológica el montar las muestras
-->Observación
Como se menciono al principio algunos autores no toman la observacion como un paso de la Técnica Histológica pero es bueno mencionarla Como se puede deducir, se observa la laminilla al microscopio y se busca lo que se necesite ver para dar un diagnostico.
Pasos de la Técnica histológica
-->Obtención del material histológico para estudiar
--> Proceso de fijación
-->Lavados
-->Deshidratación
-->Aclaramiento
-->Infiltración
-->Inclusión
--> Microtomía
-->Tinción
-->Observación (Este último no es considerado como un paso de la técnica histologica por varios autores)
-->Obtención del material histológico
Los tejidos se pueden obtener de diferentes formas:
-->Biopsia
-->Abiopsia
-->Necropsia (llamada vulgarmente autopsia)
-
->Fijación
En este paso el tejido obtenido se coloca en una sustancia fijadora para evitar los cambios post-mortem Unos de los fijadores mas usado es el Formol al 10% (Formaldehido)
Lavados
Se debe lavar el tejido para quitar exeso de fijador
-->Deshidratacion
Suena incoherente que se deba lavar el tejido y despues deshidratarlo, entonces ¿para que lavarlo? El exeso de fijador al momento de la infiltración, incluso en la microtomia, podría afectar los cortes, por eso se debe lavar. La deshidratacion se hace con el uso de alcohol de una menor concentracion a una mayor.
-->Aclaramiento
En este paso el se sustituye el alcohol por un disolvente de parafina lo mas usado es el Xilol (Xileno) ya que como esta deshidratado el xilol entrara hasta la mas profundo del tejido. Tambien el tejido pierde color hasta un tono acaramelado
-->Infiltración
En este paso la muestra se coloca en parafina liquida, cabe mencionar que se debe usar parafina histológica, como se ha dicho en el paso anterior el tejido esta completamente lleno de xilol, ahora debido a osmosis sale el xilol y entra la parafina
-->Inclusión
Aqui se forman bloques de parafina y dentro de estos bloques estan las muestras a estudiar. hay maquinas especializadas para la inclusion en parafina de tejidos Despues que se incluyeron los bloques y por conseunte se dejaron secar, estos se deben poner a enfriar en un congelador para su posterior corte
-->Microtomia
Se realizan cortes muy delgados que van deacuerdo a lo requerido o costumbre del laboratorio donde se realice la técnica, los cortes van desde .5 micras hasta 8 u 10 micras. Los cortes se echan al baño de flotacion y se ´pescan´ con un portaobjetos, se marca con la fecha, el tejido que es y con que tincion se va a procesar.
-->Tinción
Hay muchos tipos de tinciones para diferenciar en los tejidos diferentes estructuras o sustancias
La tincion mas usada o tambien llamada "De Rutina" es la de Hematoxilina y Eosina (HyE) esta usa un colorante llamado Hematoxilina en su composición según Harris que tiñe las sustacias ácidas o que las contengan, como el núcleo que contiene el Ácido Desoxirribonúcleico (ADN) La Eosina Amarillenta tiñe las estructuras básicas como el citoplasma y demas organelos
Otra tinción muy usada es la de papanicolau Usa colorantes como:
-OG6
-EA50
-Hematoxilina de Harris o Básica segun el caso
-Esta tincion es muy usada para teñir excresiones corporales como saliva, orina, etc. (La sangre NO es una excresion)
Como se menciono anterormente hay muchas tinciones Otros ejemplos son:
-Masson
-PASCHIFF
-Perls
-Plata Metenamina
-Warthin-Starry
-Ziehl-Neelsen
-Van Gieson
-Azul Alciano
-Sudan III
-Rojo Congo
Entre muchas otras tinciones...
En este paso despues de teñir se monta, es decir se coloca un cubreobjetos y se ´pega´con resina. Cabe mencionar que alguna gente toma como un paso mas de la Técnica Histológica el montar las muestras
-->Observación
Como se menciono al principio algunos autores no toman la observacion como un paso de la Técnica Histológica pero es bueno mencionarla Como se puede deducir, se observa la laminilla al microscopio y se busca lo que se necesite ver para dar un diagnostico.
Perez Monsalve Yosman
muy bueno
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